如何采集标本才能提高准确率?

如何采集标本才能提高准确率?

病毒采样管用于新型冠状病毒、流感病毒、禽流感(如H7N9)、手足口病毒、麻疹等病毒标本以及支原体、脲原体、衣原体标本的采集及运送。

病毒及相关样本的;冷藏状态下(2~8℃)的48小时内保存与运输。病毒及相关样本的-80℃环境或液氮环境中的长时间保存。

病毒采样管病毒保存液主要由:Hank’s液基础、庆大霉素、真菌抗生素、生物缓冲剂和氨基酸组成。可在较宽的温度范围内维持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分离的阳性率

临床医生是否会有这样的困扰,患者高度疑似新型冠状病毒肺炎,但两次拭子核酸检测均为阴性,那该怎么办?亦或者是两次拭子检测阴性,但周围多名与其接触者均被确诊,那他是真阴性还是假阴性?如何采集标本才能提高准确率?

标本采集部位:

很多专家从实践工作中总结出的经验认为,鼻咽拭子标本2019-nCOV核酸检测阳性率高于口咽拭子,下呼吸道采集的痰、肺泡灌洗液标本阳性率高于上呼吸道的口、鼻咽拭子采集的标本,但下呼吸道的痰、肺泡灌洗液标本采集难度大、易引起患者喷射导致采集操作者感染风险大,一般情况不建议使用(气管切开、上呼吸机抢救病人可用)。近期发布的第五版《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》已将标本采集“咽拭子”更新为“鼻咽拭子”。为了提高检测阳性率,建议采集同一病人多部位标本,合并进行检测。比如,用口咽拭子、鼻咽拭子同时采集标本,然后放到同一采集管中送检。对于有消化道症状的疑似患者,同时采集粪便和肛拭子进行检测。

标本采集方法:近期用于核酸检测标本的主要是口咽拭子,采集时让患者张大嘴后用采样拭子刮取其咽部采样带病毒标本。如果平时医护人员咽拭子取样不多,刮取样本时患者的反应又比较大,往往导致挂取标本的位置不对,或力度和时间不够,没有刮取到带病毒的标本或刮取的带病毒标本量少,最后导致检测结果阴性。

标本运输及保存条件:

2019-nCOV为RNA病毒,很容易被外源性或细胞破坏后所释放的RNA酶降解,而影响最后的检测效率。严格来讲标本采集后应及时送到实验室(疾控中心、医院检验科、第三方实验室),尽快完成检测。标本在常温条件下放置时间过长(几个小时、十几个小时、二十几个小时或更长时间),也可能是造成最后检测结果假阴性的原因。近期有人提出使用防病毒核酸降解标本采样管,但目前此类产品数量少、成本高、实际应用效果也需要进一步评价。建议标本采集后及时送检,及时检测(4小时)。如因某些原因采集后不能及时送检或及时检测,应将其置于4℃保存(24小时)。24小时内不能检测的标本,建议于-70℃以下保存并避免反复冻融。

如何使用病毒采样管

病毒采样管采集的方法和注意事项

病毒采样管的使用方法和注意事项

本一次使用病毒采样管适用于病毒样本的采集、收集、运输和储存样本的。

本产品的使用方法:

1.取样前,在标签上注明样品信息。

2.根据不同的实验目的,用取样拭子在相应的部位进行取样。

3.取样后,迅速将拭子放入垂直的放入病毒采样管中,不要碰到管壁避免污染,折断拭子尾部,弃去尾部并拧紧管盖。

4.新采集的标本可以在正常情况下运送到实验室;取样后,如不能及时处理,需要低温储藏。

本产品使用时的注意事项:

1.本产品仅用于体外诊断。禁止内服外用。

2.废物样本收集液应进行消毒。

3.如果发现样品保存液过期或泄漏,应禁止使用。

4.如发现取样拭子的包装损坏,应禁止使用,并联系厂家或者是经销商。

 

 

如何使用病毒采样管

为什么要选择非胍盐成分的病毒保存液?

为什么要选择非胍盐成分的病毒保存液?

目前,新冠病毒防控形势依旧十分严峻,作为核酸检测的第一步,样本采集与保存的重要性毋庸置疑,此前市场上的病毒保存液几乎都是直接保存活病毒,导致采样、运输和检测中的医护人员均面临着比较高的感染风险,针对这种情况,抗疫一线非常危险,后来研发出可以直接灭活病毒样本的保存液,这样可以大大地提高了样本采集、运输过程中的安全性。但是应该注意的是:在灭活病毒的同时,保存液还应考虑能否稳定保存病毒核酸的完整性,避免在检测前核酸被降解,造成“假阴性”。

但应该注意的是:在灭活病毒的同时,保存液还应该考虑到是否能够稳定保存病毒核酸的完整性,避免样本中的核酸在检测前降解,造成了核酸检测的“假阴性”。

那为什么说要选择非胍盐成分的病毒保存液呢?我们曾经做了一个实验:分别用含胍盐成分的保存液,和我们公司不含胍盐成分的保存液,在37摄氏度的条件下保存RNA病毒。

结果发现,保存1-7天后,用我们公司保存液保存的病毒核酸,CT值未见明显变化,说明病毒核酸稳定存在,没有被降解,而含有胍盐成分的保存液保存的病毒核酸CT值则随着天数的增加而有明显增加,保存效果明显弱于我们的保存液。从病毒RNA的保存液效率上看,同样都是37摄氏度的条件,保存1-7天后,使用我公司的保存液,病毒核酸保存效率基本恒定在百分之一百,而胍盐成分保存液随着天数的增加,病毒核酸的保存效率逐渐降低,到第七天的时候,已经低于百分之二十。

从病毒核酸的降解率来看,同样都是37摄氏度的条件,保存1-7天后,使用我们的保存液,病毒核酸几乎没有被降解,而使用胍盐成分的保存液会随着天数的增加,病毒核酸的降解率大幅度增加,到第7天的时候,胍盐成分保存液保存的病毒核酸几乎完全降解。

由此看出,主要成分是胍盐的保存液,保存效果并不理想。原来,胍盐作为一个经典的蛋白变性剂,常用于核酸提取中的细胞裂解,也可以达到灭活病毒的效果,但是实验结果发现,胍盐成分几乎不具备在常温条件下保存病毒核酸的能力,比较容易造成样本降解,导致“假阴性”,因此不太适合用于新冠病毒样本的保存,所以建议您选择非胍盐成分的病毒保存液。

我公司独家研制的病毒样本保存液,含有特殊的蛋白变性剂和核酸稳定剂;蛋白变性剂可以迅速佩破坏病毒外壳蛋白质的二级结构,将病毒灭活,核酸稳定剂可以常温稳定保存病毒核酸不降解。在病毒核酸的保存效果上明显优于含胍盐成分的常规裂解液,可以在37摄氏度条件下稳定保存7天,非常有利于当前新冠病毒核酸检测的样本保存。