如何采集标本才能提高准确率?

如何采集标本才能提高准确率?

病毒采样管用于新型冠状病毒、流感病毒、禽流感(如H7N9)、手足口病毒、麻疹等病毒标本以及支原体、脲原体、衣原体标本的采集及运送。

病毒及相关样本的;冷藏状态下(2~8℃)的48小时内保存与运输。病毒及相关样本的-80℃环境或液氮环境中的长时间保存。

病毒采样管病毒保存液主要由:Hank’s液基础、庆大霉素、真菌抗生素、生物缓冲剂和氨基酸组成。可在较宽的温度范围内维持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分离的阳性率

临床医生是否会有这样的困扰,患者高度疑似新型冠状病毒肺炎,但两次拭子核酸检测均为阴性,那该怎么办?亦或者是两次拭子检测阴性,但周围多名与其接触者均被确诊,那他是真阴性还是假阴性?如何采集标本才能提高准确率?

标本采集部位:

很多专家从实践工作中总结出的经验认为,鼻咽拭子标本2019-nCOV核酸检测阳性率高于口咽拭子,下呼吸道采集的痰、肺泡灌洗液标本阳性率高于上呼吸道的口、鼻咽拭子采集的标本,但下呼吸道的痰、肺泡灌洗液标本采集难度大、易引起患者喷射导致采集操作者感染风险大,一般情况不建议使用(气管切开、上呼吸机抢救病人可用)。近期发布的第五版《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》已将标本采集“咽拭子”更新为“鼻咽拭子”。为了提高检测阳性率,建议采集同一病人多部位标本,合并进行检测。比如,用口咽拭子、鼻咽拭子同时采集标本,然后放到同一采集管中送检。对于有消化道症状的疑似患者,同时采集粪便和肛拭子进行检测。

标本采集方法:近期用于核酸检测标本的主要是口咽拭子,采集时让患者张大嘴后用采样拭子刮取其咽部采样带病毒标本。如果平时医护人员咽拭子取样不多,刮取样本时患者的反应又比较大,往往导致挂取标本的位置不对,或力度和时间不够,没有刮取到带病毒的标本或刮取的带病毒标本量少,最后导致检测结果阴性。

标本运输及保存条件:

2019-nCOV为RNA病毒,很容易被外源性或细胞破坏后所释放的RNA酶降解,而影响最后的检测效率。严格来讲标本采集后应及时送到实验室(疾控中心、医院检验科、第三方实验室),尽快完成检测。标本在常温条件下放置时间过长(几个小时、十几个小时、二十几个小时或更长时间),也可能是造成最后检测结果假阴性的原因。近期有人提出使用防病毒核酸降解标本采样管,但目前此类产品数量少、成本高、实际应用效果也需要进一步评价。建议标本采集后及时送检,及时检测(4小时)。如因某些原因采集后不能及时送检或及时检测,应将其置于4℃保存(24小时)。24小时内不能检测的标本,建议于-70℃以下保存并避免反复冻融。

输入病例核酸检测“阴转阳”,检测产品到底该不该背锅?

核酸检测“阴转阳”,检测产品要背锅吗?

进入冬季以来,全球疫情加速上升,“外防输入,内防反弹”压力巨大,散点式疫情频频发生,境外输入的“人物同防”成为我国疫情防控焦点。

近期,上海浦东、山东青岛、四川成都、黑龙江绥芬河等多地已出现冷链食品导致的“物传人”疫情,此外,部分地区频频出现境外输入病例“阴转阳”的情况。即便是病毒核酸检测阳性已被公认为新冠病毒感染确诊的金标准,但一旦发生“阴转阳”的情况,大家会普遍认为是核酸检测试剂盒的锅。但是核酸检测试剂真的应该背这个锅吗?

一、输入病例“阴转阳”,核酸检测影响因素多!

频繁出现的输入病例“阴转阳”案例,犹如国内疫情早期阶段频繁出现的核酸检测“阴转阳”,问题并不完全在核酸扩增检测试剂。

影响核酸检测结果的主要因素有:

①、患者体内病毒载量。病毒在人体内的复制量尚未达到可以检测的程度;

②、样本质量因素。样本的采集是否符合规范要求?采集的标本中有没有足够病毒的细胞可用于核酸检测;

③、样本保存液与核酸提取及检测试剂的匹配性,保存液基质是否会影响核酸提取和检测质量;

④、核酸提取效率。所使用的病毒核酸提取试剂提取效率不够高

⑤、检测试剂灵敏度。所使用的病毒核酸检测试剂灵敏度不够高

这些情况的出现,均有可能导致“假阴性”的结果。

目前,国内新冠病毒核酸检测试剂盒大部分采用两个靶基因的引物探针设计,特异性有保障!但近期“阴转阳”的案例频发,不同品牌的检测试剂间检测结果差异较大,致使一些实验室和医疗机构开始质疑核酸检测产品。

了解到相关情况后,笔者认为应该理性认知,目前新形势下导致核酸检测结果差异问题主要原因有三:

其一是采样质量的问题:

新冠肺炎不同病程阶段以及机体不同部位存在的病毒量不同。有研究表明下呼吸道标本如痰的病毒浓度远高于鼻咽部(5倍以上),鼻咽部又高于口咽部(2倍左右),采样部位选择不当、采样深度不够,样本质量不佳,导致“假阴性”结果的出现。规范采样流程,严格保障采样质量,并选择人内源性内标的新冠核酸检测试剂盒,可以监测采样是否合格,避免采样原因导致的“假阴性”结果。

其二是不同厂家的新冠核酸检测试剂性能差异大,检测结果差异情有可原,外防输入的“人物同防”应选择灵敏度更高的检测试剂。

核酸浓度越高,并不代表核酸检测阳性检出率就越高,这还与核酸检测试剂相关,与引物探针设计区域的选择、反应体系的稳定性、检测试剂灵敏度相关。不同厂家的新冠核酸检测试剂,引物探针设计区域不同、检测试剂稳定性不同、试剂灵敏度不同,检测结果差异情有可原,进行新冠核酸检测,应根据防控方案、技术方案的要求,尽可能选择灵敏度高、稳定性更好的检测试剂,当前疫情防控压力大量积压在外防输入,境外输入的“人物同防”形势下,承接相关检测的实验室应该选择双靶基因、检测灵敏度更高的检测试剂,避免出现漏检。

其三是新冠病毒核酸扩增检验试剂集中采购后,采样拭子、样本保存液、核酸提取试剂难配套采购,无法由同一厂家提供,无法保障检测全程系统性。

单一的集中采购检测试剂存在较大的应用风险,决策者并没有考虑到核酸提取技术的差异性,以及采样拭子材质影响和样本保存液的基质效应所带来的系统性误差问题!

防控新形势下,核酸提取技术的选择

从今年9月份国家卫健委临床检验中心组织的全国新冠病毒核酸检测室间质量评价活动统计的2492家实验室核酸提取方法来看:

“一步法”值得关注,其提取技术占比4.9%,采用该类技术最早的企业是圣湘生物,因其200copies/mL灵敏度和非常简便的操作技术,受到众多一线操作老师的青睐,也较大程度的帮助解决了疫情防控早期核酸检测效率不高的问题。随后达安基因、卡尤迪生物、浙江东方基因、北京纳捷等企业纷纷注册类似技术产品,这类技术都很大程度的缩减了手工操作的难度,带来了诸多便利。但很多实验室都很容易忽略一点——这一类技术便捷的前提是需要使用配套的采样拭子和样本保存液,保证其系统可靠性。

随着国内新冠检测试剂集中采购后,较多实验室喜欢采购含胍盐或者其他灭活成分的样本保存液,或者采购非扩增检测试剂厂商提供的拭子和保存液,基质效应对类似“一步法”的技术影响较大。另外,除去基质效应影响外,买A家企业的样本保存液,使用B企业的提取试剂,匹配C家企业的核酸提取仪,再用D家企业的扩增检测试剂进行检测的情况在目前核酸检测实验室中非常常见。

所以,在疫情防控新形势下,面对外防输入,人物同防的高压力,我们更应该严格规范采样和检测操作,保障采样质量;选用灵敏度更高的核酸检测试剂,并且配套系统性的采样拭子和样本保存液及提取试剂,保证检测体系的系统性,才能有更加可靠的检测结果,完全甩锅给检测试剂产品或者厂商,是不合理也不科学地做法。(本文转自体外诊断网)

 

如何使用病毒采样管

如何使用病毒采样管

如何使用病毒采样管

病毒采样管是微生物采样运输管中的流感病毒等用于病毒采样的一组采样和输送的离心管,病毒采样管也被称为标本输送管,现在已经成为商品化的产品。

病毒采样管的使用方法:

①、采样前,在采样管的标签上显示相关的样品信息;

②、根据采样请求,用采样拭子对相应部位进行采样;

③、将拭子迅速放入病毒采样管;

④、将采样拭子高出病毒采样管的部分折断,拧紧管盖;

⑤、新鲜采样的临床标本在4℃下48小时内送检,48小时内不能及时送检的,在-70℃以下保存。标本送到实验室后,尽快接种分离,48小时内能接种的可以在4℃保存。无法接种时,请在-70℃以下保存。

病毒采样管的用途:

①、用于疾病管理部分、临床部分感染病原微生物的监测采样。适用于流感病毒和其他类型的病毒采样。也用于支原体、衣原体、尿素原体等的采样;

②、从采样现场到检查实验室运送鼻咽拭子标本或特定部位的配置标本,进行PCR的提取和检查;

③、保存鼻咽拭子样品或特定部位的配置标本,进行必要的细胞培养。

 

深圳一次性病毒采样管厂家

深圳一次性病毒采样管厂家

深圳一次性病毒采样管厂家

厂家介绍:

深圳市华晨阳科技有限公司注册资金5000万元,是一家致力于核酸检测、分子诊断、医学检验、病毒检测等产品研发、生产、销售于一体的国家高新技术企业。公司拥有二十多项专利,部分专利已经转化应用于市场。产品主要应用于基因检测、医疗机构、生物制药、大型甲等医院、出入境检验检疫、诊断试剂、疾控机构、刑侦法医鉴定等。近年来,公司不断加大自主研发投入,积极引进人才和技术,并与国内外多家科研机构、医学检验所以及三甲医院、基因检测公司、疾病预防控制中心等科研机构有着紧密合作,促进人类健康产业大发展。

我们的其他头衔:

深圳市华晨阳科技有限公司是深圳市企业联合会/企业家协会理事单位,是广东生物产业协会理事单位、深圳市高新技术产业协会理事单位及深圳市陕西咸阳商会副会长单位和深圳市电子商务促进会副会长单位

我们的位置:

我们不仅位于中国发展最迅速的创新科技城市——深圳市 ,还毗邻机场,出科技园门口直达107高速,所以我们的交通很是便利,

我们具体位于宝安区新桥街道黄埔社区上南东路128号4号厂房八层、十一层。

公司自主研发的产品有哪些?

公司自主研发产品有:一次性采样拭子、医用棉签、细胞保存液、唾液采集装置、运送培养基、一次性使用病毒采样管、核酸提取或纯化试剂、一次性使用采样器、一次性使用取样器、样本保存液等产品

产品资质:

我们的产品均通过欧盟CE、美国FDA、ISO13485、中国NMPA,SGS,TUV实地认证,拥有多国产品注册商标专用权与销售权,本着“质量至上,求实创新,诚信守法,合作共赢”质量方针产品远销世界各地,并获得广大客户一致认可。

一次性使用病毒采样管的分类:

我们的一次性使用病毒采样管的液体我们分为两种,一种是灭活的,一种是不灭活的,其中灭活的病毒采样管他的实操安全性会比较高,它主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液。采样时内含高浓度的可高效灭活病毒的成分,能有效阻止操作员二次感染,但是又含有能保护病毒核酸不被降解的抑制剂,从而使后续能通过NT-PCR进行检测。而且能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样品保存以及运输的成本。

而不灭活的可以主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持液型保存液。它能够保持病毒在体外的活性以及抗原和核酸的完整性,保护病毒蛋白质外壳不易分解,较大程度地保持了病毒样本的原始性。这种保存液除了用于核酸提取检测外,还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测等,但是采样后长时间保存需要保持严格低温。

对于不同的检测目的,需要选择不同的病毒采样管,目前广泛使用的这两种病毒采样管各有特点。为了满足不同的检测要求,以及不同的病毒检测实验室条件,采样不同的病毒采样管是非常有必要的。但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其它影响造成错误检测。拭子取样后,如果使用质量欠缺的采集工具或保存液,会影响后续的检测结果甚至造成误诊的假阳性,因此一定要选择具有专业资质厂家生产的病毒采样管。

我们一次性使用病毒采样管套装的组合特征:

一次性病毒采样管包括采样拭子和采样管,我们分开来说一下采样拭子的特点和采样管的特点

①采样拭子:我们公司使用的是尼龙植绒拭子(另有人造丝可选)。因为尼龙植绒对微生物、病毒无毒性作用,且不含RNA酶、DNA酶。它能最大程度的增加病毒样本的采集和释放量,确保PCR检测结果的准确性。

植绒拭子杆为ABS材质,独特的可折断设计,折断过程中无微小碎屑产生。方便放入采样管里而不被污染。

②采样管:管身及管盖为聚丙烯材质,高温高压(121°C,15min) 时不变形,低温(-196°C) 不变脆。耐静态挤压与动态撞击。底部锥形设计耐离心与震荡。内装运送培养基(灭活型、保活型),用于样本的释放保存,杜绝渗漏。

采样管内置磁珠,方便洗脱,利于病毒更多释放入样本保存液中。

一次性使用病毒采样管的作用(用途):

一次性使用病毒采样管是我们公司最畅销的明星产品,它适用于各类流感病毒、禽流感病毒、冠状病毒、手足口、风麻疹等病毒样本的核酸提取及后期病毒分离。同时也适用于衣原体、支原体、解脲支原体等标本采集和运输。通常在人体的口腔、咽喉、鼻咽、肛门等部位采集标本。

 

深圳市华晨阳科技有限公司作为已有10多年经验的医疗耗材以及研发医疗器械生产厂家,具有完善的品质管控体系和万级标准的洁净车间,确保高品质病毒采样管的专业生产,华晨阳致力于打造产品安心,流程放心,客户开心一系列产品服务,华晨阳值得您的信赖。