Taqman qPCR Master Mix(2x,No Rox) 是什么 怎么用

在分子生物学领域,TaqMan qPCR Master Mix (2x, No Rox) 是一种强大的工具,改变了科学家定量DNA和RNA分子的方式。本文深入探讨了这种强大试剂在定量聚合酶链反应(qPCR)领域的重要性和实际应用。

理解 TaqMan qPCR Master Mix (2x, No Rox)

TaqMan qPCR Master Mix (2x, No Rox) 是一种预混合试剂,由关键成分精确混合而成,这些成分对于qPCR分析至关重要。这种多用途的试剂盒简化了qPCR工作流程,为扩增和定量DNA和RNA分子提供了简化的方法。 “2x”一词表示试剂混合物中的试剂浓度是PCR反应所需浓度的两倍,节省时间并确保结果一致性。重要的是,“No Rox”表示该混合物不包含常用的ROX(羧基-X-罗丹明)被动参考染料。这对于不需要ROX标准化的仪器或分析非常理想。

构成试剂混合物的成分

  1. DNA聚合酶:通常情况下,Taq DNA聚合酶是每个循环中驱动DNA复制的引擎。
  2. 引物:这些短DNA片段作为DNA复制的起始点,因为它们与目标分子的特定区域结合。
  3. 探针:这些荧光标记的DNA片段设计用于与互补的目标DNA序列杂交。它们在扩增过程中发出信号,有助于检测。
  4. 核酸模板:您希望定量的DNA或RNA分子。它是启动扩增过程的模板。
  5. 缓冲液溶液:为聚合酶提供理想的反应条件,以便有效地扩增DNA。

掌握应用:如何使用 TaqMan qPCR Master Mix (2x, No Rox)

  1. 准备反应混合物:在冰上解冻试剂混合物并轻轻混合,以确保均匀性。计算所需反应的总体积,考虑到复制和对照。
  2. 添加模板:将您的核酸模板,无论是DNA还是RNA,引入反应混合物中。
  3. 添加引物和探针:引入为您的目标序列设计的特定引物和探针。
  4. 完成反应混合物:如有必要,使用核酸酶-free水调整体积,以达到所需的反应体积。
  5. 移液至反应孔:将反应混合物转移到qPCR板的孔中,有序地排列,以确保一致的结果。
  6. 热循环:将板放入qPCR仪器中,并启动热循环程序。这涉及变性、退火和延伸的循环,扩增您的目标序列。
  7. 数据分析:在qPCR运行后,分析荧光数据,定量样本中目标核酸的初始量。大多数仪器都提供数据分析的软件。

优势与应用

TaqMan qPCR Master Mix (2x, No Rox) 加速了qPCR工作流程,减少了移液误差的机会,简化了反应设置。它在基因表达分析、突变检测、病原体鉴定等方面应用广泛。其预优化的配方确保了再现性和准确性,在现代分子生物学实验室中是不可或缺的工具。

总结

TaqMan qPCR Master Mix (2x, No Rox) 已成为现代分子生物学研究的基石。凭借其预组合的成分和简化的应用过程,它使科学家在自信地深入研究DNA和RNA定量的同时,拥有了自己强大的工具。随着技术的不断进步,这种试剂将继续在揭示基因密码的奥秘中发挥重要作用。

基因检测未来有什么趋势

基因检测未来有什么趋势

基因检测是未来的发展趋势,具体有以下几种趋势:

  • 价格平民化 。基因检测的费用较高,普通民众难以承担,随着技术的进步和市场的竞争,基因检测的费用会逐渐降低,让更多的人能够享受到基因检测带来的福利。
  • 检测周期缩短 。目前基因检测需要较长时间才能得出结果,未来随着技术的进步,检测周期会逐渐缩短,能够更快地得出检测结果。
  • 检测结果更精准 。随着技术的进步,基因检测的准确性会不断提高,能够更准确地预测疾病的发生和药物的效果。
  • 更广泛的应用领域 。基因检测目前主要应用于医疗领域,未来会扩展到更多领域,如农业、食品、环保等。

什么是基因检测

基因检测是指通过血液或其他体液对基因进行的检验技术,通过对基因的提取、分析来检查基因的结构以及表达的遗传信息是否正常,可以帮助判断某些疾病的发生风险或发展程度,从而预防或治疗某些疾病12

基因检测的主要手段有生化检测、染色体分析以及DNA分析,常见的用途有:

  1. 临床疾病诊断,尤其是对于胎儿的某些疾病的诊断,如唐氏综合征等2
  2. 检测患病风险,如糖尿病、高血压、阿尔兹海默症以及某些恶性肿瘤等2
  3. 指导精准用药,基因检测有助于指导临床医生选择治疗药物及判断用药剂量等

 

口腔拭子怎么采集样本做亲子鉴定?

口腔拭子怎么采集样本做亲子鉴定?

口腔拭子怎么采集样本做亲子鉴定?

口腔拭子可以说是万能的DNA亲子鉴定样本,属于亲子鉴定常规样本的一种。口腔拭子适合所有人群,对被鉴定人并没有什么具体要求,采样后也没任何疼痛或者是影响。

那么口腔拭子是如何采集样本做亲子鉴定呢?

口腔拭子怎么采集样本做亲子鉴定?

口腔拭子采集步骤:

1、在采样前30分钟禁止进食。

2、用口腔拭子的一面在口腔内壁一侧反复擦拭至少10次,至少取3根(擦拭时注意使用采样拭子和口腔内壁尽量有大面积的接触)。

3、采样完成后,再用拭子的另一面重复相同操作。

4、将成功采样的拭子自然风干后包在干净的餐巾纸里,放进生物安全袋里送检。

注意事项:

1、注意将不同被鉴定人的样本单独放置,不能相互接触。

2、避免用手触及拭子头。

3、注意将不同被鉴定人的样本单独放置在不同的信封中,信封上标记清楚样本身份(如:父亲、孩子等)不推荐自行采集样本,以免标本造成污染,影响鉴定,最好到鉴定中心,由专业人员进行采集。

华晨阳拭子供应商

华晨阳拭子供应商

华晨阳拭子供应商

深圳市华晨阳科技有限公司,成立于2008年6月2日,公司拥有3大业务版块,商务运营中心位于深圳市宝安区壹方中心、研发实验中心位于深圳市南山区、生产制造中心位于深圳市宝安区新桥街道,公司面积15000平方米,注册资金5000万元,现有员工300余人,是一家致力于核酸检测、分子诊断、医学检验、病毒检测等第一类、第二类、第三类医疗器械产品研发、生产、销售于一体的国家级高新技术企业。

华晨阳科技致力于生物样本采集与保存医疗产品,是著名的医疗采样保存产品专业制造商,公司拥有52项专利,其中30项专利已经转化应用于市场。产品主要应用于基因检测、生物制药、大型甲等医院、出入境检验检疫、诊断试剂、疾控中心、公安刑侦、法医鉴定等医疗机构。公司陆续与国内30余所高校、50余家国家科研机构、200余家三甲医院、600余家疾病预防控制中心、1000余家基因检测第三方医学检验机构建立了良好的合作关系。

公司自主研发产品有:一次性使用病毒采样管、一次性采样拭子、医用棉签、细胞保存液、唾液采集装置、运送培养基、一次性使用采样器、一次性使用取样器、样本保存液、核酸提取试剂、基因检测试剂、新冠肺炎检测试剂等产品。公司产品均获得中国NMPA、欧盟CE、美国FDA EUA、SGS、TUV、TGA、ISO13485认证资质,拥有多国产品注册商标专用权与销售权,产品远销欧洲、美洲、亚洲、中东等120个国家,获得广大客户的一致好评与认可。

深圳市华晨阳科技有限公司将以“传承创新、科技制胜”为宗旨,秉承“质量至上、求实创新、诚信守法、合作共赢”的企业文化,为全球提供优质的医疗器械及诊断试剂!

一次性采样拭子,又叫一次性使用采样拭子,就是现在核酸检测用的比较多的检测工具,可以采集口腔黏膜细胞,口腔微生物,物表微生物,物表细菌,病毒采样转运,DNA,RNA采集,咽喉采样,宫颈采样,鼻咽采样。可协助医院或者实验室检测病毒或者研究病毒采样使用,供人体或者是动物自然腔道,如咽喉、鼻腔、口腔、阴道等部位沾取生物样本检验用。也可用于人体口腔或鼻腔的疾病检测,需要采用采样拭子进行口腔表皮细胞或鼻腔病毒样本的采集,并将细胞或样本保存于采集管,再转移至化验室进行检测。

产品特点

1、采用了喷雾和静电电荷的植绒方法,使数百万个尼龙微纤维垂直均匀地附着于柄端,尼龙纤维束之间的毛细血管作用,有利于液体样本像强液压式吸收。

2、具有超常的吸水能力,可以将其表采集的标本数量由传统采样拭子的20%提高到了60%。

3、对收集到的标本有超过90%的释放率,从而确保了结果的高度可靠性。

4、塑料杆上有独特的可折断设计,方便标本运输。

5、针对不同的标本类型选用了不同的保存液。

6、使用无抑制DNA扩增材料制成,经过可以直接PCR扩增的验证,省去提取步骤。

7、严格的工艺条件,不含DNA酶和可扩增的人类DNA。

8、管体透明,检材情况直观可见。

9、独有的套管设计,保证套管内空气流通,防止检材因潮湿密封环境而导致霉变,同时避免外部空气中杂志污染,进而影响检验质量。

10、采用单只独立包装,避免污染。

肛拭子检查是怎么检查的?

肛拭子检查是怎么检查的?

肛拭子检查是怎么检查的?

肛门拭子检查法是一种主要针对肛门,以及肛门周围组织有无细菌、病毒、寄生虫感染情况所进行的检查方法。肛拭子是用于检查寄生虫的辅助检查方法,此法是根据雌性蛲虫在人体肛门周围及会阴部皮肤产卵,带绦虫孕节从肛门排出或主动逸出过程中破裂、虫卵粘附在肛门周围皮肤上的特性而设计的。

使用方法

1、取出采样拭子,不要触碰到别的部位或者是其他地方,以免污染拭子。

2、将拭子轻轻插入肛门内3~5米处。

3、用拭子在肛门内选装4~5圈后将拭子轻轻拔出。

4、将采样拭子垂直地放入采样管内即可。

注意事项

1、采样前要做好清洁。

2、检测时要稳定情绪,不要过度紧张和害羞,不要因为尴尬而不配合医生的工作。

3、使用肛拭子检测寄生虫时,请不要吃抗寄生虫药。

4、有痔疮、肛周脓肿、肛门糜烂或溃疡者不适合做肛拭子。

5、刚做完痔疮和肛肠手术者不合适做肛拭子。

6、有以上情况者,应提前和采样人员进行沟通。

鼻拭子比口咽拭子检测更准确

鼻拭子比口咽拭子检测更准确

鼻拭子比口咽拭子检测更准确

咽拭子分为鼻咽拭子口咽拭子。那两者有什么不同呢?

蔡跃新副主任表示,咽部分区分包括鼻咽、口咽、候咽,三者粘膜连续,均属于上呼吸道区域。鼻咽拭子和口咽拭子只是采样的路径不同。经口采样就口咽拭子,经鼻采样是鼻咽拭子。

梁发雅副主任医师说,由于口咽拭子张口就可以进行操作,比较简单,所以临床上比较常用。但是,口咽拭子采样患者的暴露风险很高,采样操作者需要正对着患者,采样过程中患者容易出现刺激性干咳、呕吐等症状,这样采样者就暴露在带病毒的气溶胶传播中。

经专家研究发现,鼻拭子更容易检查出核酸阳性,采样时间可以在鼻咽处停留的时间更长,可以得到更大分量的样本,这也是文献报道鼻咽拭子阳性率更高的原因。另外,如果患者耐受性高,通常可以先进行鼻腔黏膜的表面麻醉和收缩,熟练的采样者可以在没有麻醉的情况下对患者进行采样。

鼻咽采样时,操作者可以站在患者一侧后方操作,因此患者降低口罩只露出鼻孔,盖住口腔,不需要直视患者的口腔,几乎没有咽反射,暴露风险相当低。每个患者采样后都有可能出现喷嚏反射,也可以立刻用手肘和纸巾挡住。

咽拭子核酸检测标本的采集如果操作不规范,可能会导致“假阴性”的结果,导致患者的治疗延迟。

那么,咽拭子核酸检测标本的采样的关键是什么呢?田鹏副主任医师表示,无论是鼻咽拭子采样还是口咽拭子的采样,采样的深度和拭子与粘膜的接触时间都很重要。即使采样鼻咽拭子,有可能也无法采集到鼻咽深处,如果采集口咽拭子,患者的呕吐反应大,采样时间不足,那么,可能采集到的样本是不含病毒的,这就很有可能引起和酸检测的“假阴性”,有些患者核酸检测后会“复阳”跟抽样不准确有着很大的关系。

咽拭子不能用什么材质?

咽拭子不能用什么材质?

咽拭子不能用什么材质?

咽拭子不能用什么材质呢?我们都知道咽拭子是直接接触采样部位的,其采样头的材质与后续的检测关系密切。

采样拭子头应该采用PE合成纤维或者是人造纤维制成,不能使用海藻酸钙海绵或木棒拭子(包括竹签),拭子头部也不可以用棉花制品,因为棉花的纤维对蛋白质的吸附性较强,不易洗脱到后续的保存液中;而含有海藻酸钙和木质成分的木棒或竹签折断后浸泡在保存液中也会吸附蛋白,甚至会对后续的PCR反应有抑制作用。

制造拭子头的材料推荐使用PE纤维、聚酯纤维、聚丙烯纤维等合成纤维。不建议使用棉花等天然纤维,不建议尼龙纤维,因为尼龙类的纤维(类似于牙刷刷头)吸水性不佳,会导致采样量不足,影响初检率。

制造拭子柄的材料不能添加海藻酸钙类助剂;不推荐使用木棒或竹签。总之,采样拭子应保证采样量和释放量,所选的材料不可以有影响后续检测的物质。

植绒拭子的原理

植绒拭子的原理

植绒拭子的原理

植绒拭子的顶端为尼龙纤维结构,在医用ABS塑料杆上的表面用静电场按方向附着尼龙纤维形成刷状层,其层间充分平行,垂直于内部杆的表面,用该刷头进行了DNA的采集。

植绒拭子使用现有的技术“喷涂技术”,就是通过静电电荷在植绒的过程中使数百万尼龙纤维垂直附着在医用拭子杆的头部上。

垂直的尼龙纤维类似于一把软刷,如果在采样过程中使用这种软刷,使用者在使用的过程中不会有异物感。

此外,部位不同,使用的植绒拭子的折断点也不同,拭子杆的粗细也有所差别。因此柔软度有很大差异。例如鼻拭子,拭子杆的上端细而软的,折断点也比较后端。

植绒拭子通过刷状纤维层的定向摩擦效果,可以完全捕获细胞样本,而植绒拭子前端的尼龙纤维之间的毛细管运动,可以形成用于吸收液态或者细胞系样本的强液压,细胞样本也可以很均匀很整齐地集中在刷状纤维的近表面,因此最终可以释放约95%以上的样品。

采样拭子要用什么材质才不会受到影响

采样拭子要用什么材质才不会受到影响

采样拭子要用什么材质才不会受到影响

用于病毒采样的拭子是要直接接触采样部位的,采样头的材质和后续检测密切相关,病毒采样拭子的材质要求就会很高。

我们可以采用合成纤维来做拭子头,比如、植绒、PE纤维,聚酯纤维和聚丙烯纤维,海藻酸钙海绵是被禁止做采样拭子材料的。

病毒采样拭子头应使用聚酯(PE)合成纤维或人造纤维制成,不得使用海藻酸钙海绵或者是木质杆拭子(包括竹签杆的),而且拭子的头部不可以使用棉花缠绕在杆上,因为棉纤维具有很强的蛋白质吸附能力,所以不容易被洗脱到随后的保存液中;而含有海藻酸钙和木质成分浸入保存液后也会吸收蛋白质,甚至会抑制随后的PCR反应。

 

采样拭子要用什么材质才不会受到影响

拭子杆有折断型和内置型两种类型

一般折断型的拭子在采样后可以直接将拭子放进病毒保存液里,在折断口处折断拭子并弃去尾部,拧紧瓶盖,及时送检即可。这种拭子也是比较常见的。

内置拭子是管盖和拭子是连在一块的,直接采样后把拭子放进采样管拧紧就好了,这种不需要折断拭子直接采完样直接送检即可,这种拭子一般用于干采。

采样拭子和病毒采样管是需要确保采样量和释放量的,而且采样拭子和病毒采样管的质量是可以直接影响后续检测的结果的,所以一定不能够使用对后续检测有影响的材质,特别是海藻酸钙和木制竹制等材质。

采样拭子要用什么材质才不会受到影响

选择优质的拭子要考虑什么因素?

选择优质的拭子要考虑什么因素?

选择优质的拭子要考虑什么因素?

最好是选用植绒拭子,因为跟普通的棉拭子比较,植绒拭子可以对临床微生物标本更好的采集,而且运输也要比棉拭子方便。要选择对微生物无毒害的,达到医疗等级的,能最大程度的采集标本和释放标本的。拭子要无臭无味、洁白无瑕。

华晨阳口腔拭子的优点:

①、具有超凡的吸水能力,其表面采集到的标本数量大大提高,是传统拭子采集量的三倍;

②、对采集到的标本有超90%的释放率,从而确保了标本结果的准确性;

③、针对不同的标本类型可以选择不同的保存液进行采样。

口腔拭子的采样方法:

①、采样前:请在采样前30分钟,不要吃任何东西,吸烟、喝酒等;

②、撕开口腔拭子的外包装,小心地取出口腔拭子;

③、抓住拭子手柄处,将拭子伸进左面口腔,用刷牙的力度上下擦拭,让拭子的头部充分接触口腔黏膜,重复此动作1分钟;

④、用同样的方式在右脸颊处进行第二根拭子的取样;

⑤、将沾有口腔掉落的细胞的拭子在洁净通风处晾干,将拭子放进拭子的长管,完成取样;

⑥、在拭子的长管标签上填写详细信息,将拭子管装进生物样本安全袋里,再在生物样本安全袋出填写采样的相关信息。

⑦、及时送检。